W zakresie selekcji kandydatów na lek w przedklinicznej metodyce badań in vitro i ex vivo

• badanie powinowactwa nowych struktur (związków) do określonego celu biologicznego (tj.: receptory sprzężone z białkiem G, kanały jonowe, receptory jądrowe, transportery błonowe) za pomocą metod radioreceptorowych lub z użyciem ligandów fluorescencyjnych – badania skriningowe i dokładna charakterystyka z wyznaczeniem wartości K_i, IC₅₀ /Sprzęt: Zestaw do badań izotopowych/System Monolith Pico Red
• określanie parametrów kinetyki wiązania dla związków względem wybranego receptora – za pomocą metod radioreceptorowych oraz bezznacznikowych (wyznaczenie wartości k_on/K_off i K_d) /Sprzęt: Zestaw do badań izotopowych/System SPRm 200 Series
• określenie zmian gęstości receptorów z wyznaczeniem wartości B_max i K_d /Sprzęt: Zestaw do badań izotopowych
• określenie rodzaju modulacji allosterycznej nowych ligandów z wyznaczeniem wartości EC₅₀/IC₅₀. /Sprzęt: Zestaw do badań izotopowych/Platforma do badań elektrofizjologicznych
• ocena wpływu związków na aktywność funkcjonalną transporterów komórkowych (np. SERT, DAT, NET). /Sprzęt: Zestaw do badań izotopowych
• określenie aktywacji/hamowania kanałów jonowych za pomocą funkcjonalnych metod elektrofizjologicznych oraz alternatywnych metod fluorescencyjnych. /Sprzęt: Platforma do badań elektrofizjologicznych/Czytnik wielofunkcyjny
• oznaczenie aktywności inhibitorów/aktywatorów enzymatycznych (fosfataz, fosfodiesteraz, monoaminoaksydaz, kinaz) z użyciem preparatów enzymów rekombinowanych /Sprzęt: Czytnik wielofunkcyjny
• badanie procesów transdukcji sygnału w ocenie aktywności funkcjonalnej ligandów receptorowych (wyznaczenie wartości E_max, EC₅₀/IC₅₀) (m.in.: określenie aktywności wewnętrznej ligandów GPCR i potencjalnej selektywności funkcjonalnej w oparciu o aktywację wybranych szlaków sygnałowych w komórce np. poprzez badanie wtórnych przekaźników tj. cAMP, Ca²⁺, badanie poziomu białek tj. ERK1/2, AKT, mTOR, CREB, BDNF czy rekrutacja β-arestyny) /Sprzęt: Czytnik wielofunkcyjny/System do automatycznego obrazowania komórek
• Badanie oddziaływania nowych związków i materiałów na fenotyp komórek w modelach hodowli pierwotnych (zróżnicowane pluripotencjalne komórki macierzyste o charakterze neuronów lub kardiomiocytów, hepatocyty (mysie, szczurze, ludzkie), fibroblasty ludzkie, embrionalne fibroblasty mysie) lub unieśmiertelnionych linii komórkowych (kolekcja kilkunastu linii ciągłych, m.in. komórki HepG2, PC3, PC-12, SH-SY5Y, IMR-32, MCF-7, Caco-2, Jurkat, HeLa, Neuro-2a, BV-2, HT-22, RAW 264.7, Caco-2, HL-1, HL-60) /Sprzęt: System do automatycznego obrazowania komórek
• Badanie wzrostu neurytów, procesów apoptozy (m.in.: oznaczanie kaspazy 3/7 i 8/9, aneksyny, test TUNEL), poziomu markerów antyoksydacyjnych (ROS, potencjał mitochondrialny), ekspresji białkowych markerów wewnątrzkomórkowych i zewnątrzkomórkowych (np. markery zapalne, produkcja cytokin, interleukin), badanie migracji komórek i właściwości fagocytarnych /Sprzęt: System do automatycznego obrazowania komórek/ xCELLigence RTCA
• oznaczenie profilu bezpieczeństwa kandydatów na lek (m.in.: test mutagenności Amesa, wieloparametrowe oznaczanie cytotoksyczności związków względem panelu linii komórkowych oraz komórek pierwotnych do oceny aktywności neurotoksycznej, kardiotoksycznej i hepatototoksycznej), obejmujące oznaczenia: proliferacji i morfologii komórek (test MTS, PrestoBlue), wewnątrzkomórkowej akumulacji fosfolipidów i lipidów jako markery fosfolipidozy (LipidTOX stains), badanie funkcji mitochondriów związanej z toksycznością leków (depolaryzacja wewnętrznej błony mitochondrialnej, MitoTracker), badanie uszkodzeń błony komórkowej (test LDH, barwienie kalceiną-AM /Sprzęt: System do automatycznego obrazowania komórek/Czytnik wielofunkcyjny